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香港SARS疫潮过后，人们终于从阴霾中走出来。脑外科医生程至美突然得知前女友的死讯，情绪崩溃，极度自责抑郁。法医岑雅晴伴其左右，鼓励他重新建立信心。急症室医生黎国柱结束了与女友的恋情，却卷入与骨科医生叶淘及见习医生曾淑淇的三角恋中。不幸感染SARS的心脏科医生林敏智留下后遗症，为保全名声而隐瞒病情，却令病情日益恶化。

《马大帅2》仍是延续之前《马大帅1》的喜剧风格，不同的是《马大帅2》中的矛盾冲突更复杂，人物之间的碰撞也更多，第二部是由“办学”这一条线引出来的，之后的故事就自然发生、发展。这结局也就自然归到了马大帅